抗苏丹红Ⅰ号单抗的制备及用于检测食品中苏丹红含量的酶联免疫方法建立

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将羧基苏丹红Ⅰ号分别与BSA和OVA偶联,制得免疫抗原和包被抗原。免疫BALB/c小鼠,取脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选获得能分泌抗羧基苏丹红抗体的杂交瘤细胞株。将该细胞株接种BALB/c小鼠腹腔,产生的腹水经辛酸-饱和硫酸铵法纯化获得腹水型苏丹红单克隆抗体,效价为1:128 000。以该腹水型单抗建立的对苏丹红Ⅰ号和对位红的竞争ELISA检测法,IC50值分别为0.8μg/L和4μg/L,与苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号和其他染料的交叉反应率均小于2.2%。用乙腈法提取番茄酱中的苏丹红Ⅰ号或者对位红,回收率为69.8%~118%。该方法灵敏特异,可作为快速检测食品中添加苏丹红Ⅰ号和对位红的初筛方法。
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