【摘 要】
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[目的]本试验旨在建立一套稳定的鸡肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、纯化和培养技术,为深入研究鸡舍空气污染物对鸡肺泡功能影响提供体外研究模型。[方法]采用Ⅰ型胶原酶对16日龄鸡胚
【机 构】
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南京农业大学动物科技学院/南京农业大学家畜环境控制与智慧生产研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31772648,32072781),国家重点研发计划项目(2016YFD0500505)
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[目的]本试验旨在建立一套稳定的鸡肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、纯化和培养技术,为深入研究鸡舍空气污染物对鸡肺泡功能影响提供体外研究模型。[方法]采用Ⅰ型胶原酶对16日龄鸡胚的肺组织进行消化,经过差速离心和差速贴壁法分离细胞,采用鸡免疫球蛋白G(IgG)免疫吸附法纯化细胞,再利用免疫荧光检测和碱性磷酸酶进行细胞鉴定。[结果]培养18~24 h细胞伸展贴壁,细胞为多边形,呈岛屿状生长;培养24~72 h,细胞增殖代谢旺盛,胞核明显,胞浆丰富,细胞之间逐渐连接成单层;培养72 h后,细胞内颗粒物减少,细胞形态改变。免
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