【摘 要】
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目的:探讨腺相关病毒(AAV)介导的PD-L1基因转染对大鼠移植肝的保护作用及其可能机制。方法:96只近交系大鼠随机分为等基因肝移植组(G1)、同种异体肝移植组(G2)、AAV空载体组(
【机 构】
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徐州医学院附属医院普外科; 第三军医大学西南医院肝胆外科研究所; 第三军医大学免疫研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助(No.30400418)
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目的:探讨腺相关病毒(AAV)介导的PD-L1基因转染对大鼠移植肝的保护作用及其可能机制。方法:96只近交系大鼠随机分为等基因肝移植组(G1)、同种异体肝移植组(G2)、AAV空载体组(G3)和PD-L1转染组(G4),每组12对。通过大鼠肝移植急性排斥模型,将PD-L1-AAV2-RFP(RFP)经门静脉灌注夹闭法转染供肝,观察移植后大鼠中位生存时间(MST),全自动生化分析仪测定肝功能,在荧光显微镜、光镜同视野下观察RFP在移植肝的表达和病理变化。采用免疫组织化学染色法评估PD-L1蛋白的表达及炎性细胞浸润情况。结果:G1在观察期内全部存活;G2与G3 MST分别为18(17~20)d和18(17~19)d;G4显著延长了移植肝的存活(MST 29 d,P<0.05)。术后14 d G4的肝功能及病理变化与术后7 d G2和G3相似。G3、G4术后7 d中观察到明显的红色荧光,随时间逐渐增强。移植肝PD-L1蛋白的变化趋势与RFP的表达相似。G1移植肝T细胞含量极少;术后14 d G2、G3移植肝CD4+、CD8+、CD25+不同程度淋巴细胞浸润,G4移植肝T淋巴细胞浸润明显减少,尤以CD8+细胞为著,与各组相比差异显著(P<0.05)。结论:腺相关病毒介导的PD-L1基因转染可延长移植肝的存活,其机制可能是PD-L1基因转染增强了PD-L1/PD-1信号通路,通过抑制移植肝CD4+、CD8+、CD25+T细胞浸润及其功能,从而发挥对移植肝的保护作用。
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