宣白承气汤对脂多糖诱导月微血管内皮细胞损伤模型mTOR/自噬信号通路的影响

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目的 探讨宣白承气汤对脂多糖(LPS)致大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤模型雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/自噬信号通路的影响.方法 实验细胞分为正常组、模型组、雷帕霉素组和宣白承气汤(低、中、高剂量)组,ELISA检测白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;实时荧光定量PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、P70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K1)、真核起始因子4E(eIF4E)和真核起始因子4E结合蛋白1(eIF4E-BP1)mRNA表达,Western blot检测p-mTOR、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、微管相关蛋白1轻链3(LC3B)和泛素化结合的接头蛋白(P62)蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组细胞TNF-α、IL-6含量明显升高,HIF-1α、eIF4E-BP1和p70S6K mRNA表达显著升高,p-mTOR和VEGF蛋白表达明显升高,LC3B蛋白表达明显降低;与模型组比较,宣白承气汤中剂量组中TNF-α、IL-6含量降低,宣白承气汤低、中剂量组中HIF-1α、eIF4E-BP1、p70S6KmRNA表达降低,宣白承气汤高剂量组中eIF4E-BP1、p70S6KmRNA表达降低,宣白承气汤中剂量组p-mTOR、VEGF蛋白表达降低,宣白承气汤中、高剂量组LC3B蛋白表达量明显升高.结论 宣白承气汤减轻脂多糖诱导PMVECs的炎症损伤机制可能与抑制mTOR蛋白磷酸化,增强细胞自噬,抑制HIF-1α表达,降低VEGF蛋白表达有关.
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