【摘 要】
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目的实现铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)全基因的可溶性表达.方法用基因重组技术构建pMAL-PEA原核分泌型表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行表达,然后利用直链淀粉树脂对表达蛋白进
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目的实现铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)全基因的可溶性表达.方法用基因重组技术构建pMAL-PEA原核分泌型表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行表达,然后利用直链淀粉树脂对表达蛋白进行亲和层析纯化.结果酶切鉴定及测序结果表明pMAL-P2X载体上成功地插入了PEA全基因.用IPTG诱导目的基因表达,表达的融合蛋白量约占细菌总蛋白的20%.表达产物经超声处理后,80%的融合蛋白存在于上清液中,说明实现了PEA的可溶性表达.表达的融合蛋白经亲和层析纯化后进行SDS-PAGE电泳,显示为一条蛋白带,分子量约为11
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