黄连素抑制兔骨关节炎软骨基质金属蛋白酶-13及血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶-5表达保护软骨基质的实验研究

来源 :中华风湿病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:q815034246
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目的

观察关节腔内注射黄连素对兔OA关节软骨的保护作用以及软骨中MMP-13及血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶-5(ADAMTS-5)表达的影响,并探讨其作用机制。

方法

30只雄性新西兰大白兔行双侧前膝交叉韧带切除术(ACLT),术后4周,根据随机化原则于每只兔一侧膝关节腔内注射100 μmol/L黄连素溶液(实验组)0.3 ml,另一侧关节腔内注射相同剂量的0.9%氯化钠注射液(安慰剂组),每周1次,共注射5周。术后9周处死兔子,获取膝关节股骨内髁标本。取其中10只兔子膝关节采用实时定量(RT)-PCR方法检测各组关节软骨中MMP-13、ADAMTS-5、蛋白聚糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原的mRNA表达。另取10只兔子膝关节行番红素O染色并行Mankin评分定量评估软骨组织退变情况,用免疫组织化学方法定性观察关节软骨中MMP-13及ADAMTS-5的表达量。取剩余的10只兔子膝关节标本行软骨组织羟脯氨酸(Hyp)及糖胺聚糖(GAG)含量测定。组织学评分及mRNA表达量的比较采用两独立样本均数t检验。

结果

组织病理学Mankin评分显示实验组(6.9±1.9)软骨病变程度轻于安慰剂组(9.3±1.2),差异具有统计学意义(t=3.394,P<0.01)。与安慰剂组相比,黄连素处理后软骨组织内MMP-13(160±54)及ADAMTS-5(166±47)的mRNA较安慰剂组(233±45;234±67)表达降低(t=3.311,P<0.01;t=2.651,P<0.05),而蛋白聚糖(261±50)、Ⅱ型胶原(335±64)的mRNA表达较安慰剂组(186±64和254±69)升高(t=2.941,P<0.01;t=2.743,P<0.05),差异具有统计学意义。组织生物化学检测显示,实验组软骨羟脯氨酸[(23.5±2.8)μg/mg]和糖胺聚糖[(30±3)μg/mg]含量均高于安慰剂组[(19.9±2.8)μg/mg和(27.4±2.9)μg/mg],差异具有统计学意义(t=2.923,P<0.01;t=2.111,P<0.05)。

结论

黄连素对OA关节软骨基质降解因子MMP-13及ADAMTS-5的表达有抑制作用,对OA软骨结构具有一定的改善作用。

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