【摘 要】
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目的:分析探讨桔梗治疗哮喘的潜在作用机制.方法:采用TCMSP和TCMID数据库,以“OB≥30％,DL≥0.18,HL≥4h”为限定条件,检索得到与桔梗相关的活性成分;通过Swiss TargeTCMStPrediction,SEA数据库和TTD、DisGeNET、GAD数据库相结合,获得桔梗治疗哮喘的候选靶点.使用String数据库结合Cytoscape 3.7.2软件,获得桔梗治疗哮喘的候选靶点相互作用关系及网络图.采用Cytoscape 3.7.2软件的ClueGO插件,对其进行GO分类富集分析.
【机 构】
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河南中医药大学药学院,郑州 450046;河南中医药大学中医药科学院,郑州 450046;纽约医学院微生物和免疫学科,纽约 10595
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目的:分析探讨桔梗治疗哮喘的潜在作用机制.方法:采用TCMSP和TCMID数据库,以“OB≥30％,DL≥0.18,HL≥4h”为限定条件,检索得到与桔梗相关的活性成分;通过Swiss TargeTCMStPrediction,SEA数据库和TTD、DisGeNET、GAD数据库相结合,获得桔梗治疗哮喘的候选靶点.使用String数据库结合Cytoscape 3.7.2软件,获得桔梗治疗哮喘的候选靶点相互作用关系及网络图.采用Cytoscape 3.7.2软件的ClueGO插件,对其进行GO分类富集分析.通过KOBAS3.0对其进行KEGG通路富集分析.使用Cytoscape 3.7.2软件构建“成分-作用靶点”及“桔梗-成分-靶点-通路”相互作用网络图.采用LPS诱导的人支气管上皮细胞(16HBE)炎症模型,RT-PCR法检测桔梗皂苷D对16HBE细胞的Tnfα、Il1β、Il1α mRNA表达的影响;采用Western Blot法检测桔梗皂苷D对16HBE细胞的MMP9蛋白表达的影响.结果:从数据库中得到桔梗活性成分40个,包括桔梗皂苷D、金合欢素、木犀草素等;桔梗治疗哮喘的候选靶点100个,包括TNF、IL-6、VEGFA、IL-1β等.GO分类富集分析,其中BP分析40个条目、CC分析37个条目、MF分析49个条目.KEGG通路富集分析,得到150条通路,主要包括神经活性配体-受体相互作用信号通路、cGMP-PKG信号通路、PI3K-AKT信号通路等.桔梗皂苷D对LPS诱导的16HBE细胞增殖有显著的抑制作用;与模型对照组比较,桔梗皂苷D可以显著下调16HBE细胞Tnfα、Il1β、Il1α mRNA表达及MMP9蛋白表达.结论:桔梗对哮喘有潜在的治疗作用,其中桔梗皂苷D是有效成分之一,其作用机制是通过降低Tnfα、fl1β、Il1α mRNA表达,抑制哮喘气道重塑的生物标志物MMP9蛋白表达来发挥治疗作用.
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