【摘 要】
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目的探讨Purα蛋白对匹罗卡品诱导癫痫大鼠海马所致DNA损伤的保护作用，以及Purα蛋白在DNA损伤修复中的作用。方法将Purα蛋白过表达的慢病毒和Purα siRNA慢病毒在立体定位仪指导下注入大鼠海马组织。注入后14 d通过荧光切片和免疫印迹证实病毒已经在海马组织表达，然后用匹罗卡品腹腔注射诱导癫痫发作。癫痫发作1 h后处死动物，分别取样进行免疫组织化学和免疫印迹检测与DNA损伤和修复。结果免
【机 构】
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目的探讨Purα蛋白对匹罗卡品诱导癫痫大鼠海马所致DNA损伤的保护作用，以及Purα蛋白在DNA损伤修复中的作用。
方法将Purα蛋白过表达的慢病毒和Purα siRNA慢病毒在立体定位仪指导下注入大鼠海马组织。注入后14 d通过荧光切片和免疫印迹证实病毒已经在海马组织表达，然后用匹罗卡品腹腔注射诱导癫痫发作。癫痫发作1 h后处死动物，分别取样进行免疫组织化学和免疫印迹检测与DNA损伤和修复。
结果免疫组织化学结果表明，DNA损伤标志性蛋白γH2AX在大鼠CA1区的表达，各组选20张相同背景色的海马CA1区通过图像分析软件iPP6.0测定阳性细胞的平均光密度值；与空载组(0.40±0.11)和对照组(0.42±0.05)相比，Purα过表达组(0.15±0.10)免疫着色阳性细胞数目明显减少(P<0.01)；而在Purα沉默组(0.68±0.06)明显增高(P<0.01)。免疫印迹结果表明，在DNA损伤修复相关蛋白Parp–1的表达上：与空载组(0.93±0.11)和对照组(1.00±0.00)相比，Purα过表达组(0.17±0.09)的表达明显降低(P<0.01)；Purα沉默组的表达明显增高(P<0.01)。
结论癫痫发作早期可引起明显的DNA损伤，Purα蛋白对癫痫引起的DNA损伤有明显的保护作用。
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