【摘 要】
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目的 观察骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)7重组腺病毒对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)骨向分化的影响.方法 构建重组腺病毒载体pAd-BMP-7,
【机 构】
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华北煤炭医学院口腔系,华北煤炭医学院口腔系病理教研室,四川大学华西口腔医学院口腔颌面外科
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目的 观察骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)7重组腺病毒对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)骨向分化的影响.方法 构建重组腺病毒载体pAd-BMP-7,测定其滴度.应用pAd-BMP-7和空白载体pAdTrack-CMV分别转染MSC,检测外源基因转染效率,并应用RT-PCR、免疫细胞化学手段检测BMP-7的表达.将MSC分为3组,A组:转染pAd-BMP-7;B组:转染pAdTrack-CMV;C组:转染pAdzTrack-CMV+骨向分化液.观察其矿化结节形成,评价3组细胞骨向分化情况.结果 重组腺病毒pAd-BMP-7的滴度可达2.0×1015 pfu/L;外源基因的转染效率为99%,表达时间持续5～7周,3周内表达水平较高.RT-PCR和免疫细胞化学检测证实了BMP-7在MSC中的有效表达.病毒转染后,A组和C组细胞均有矿化结节形成,其中A组矿化结节数目显著多于C组(P＜0.01);B组无矿化结节形成.结论 BMP-7重组腺病毒可有效转染大鼠骨髓MSC,并促进其骨向分化,转染的BMP-7得到了有效表达.
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