利用同源重组的方法提高大肠杆菌W3110天冬氨酸的积累

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：eu2005

【摘要】

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大肠杆菌中存在3种天冬氨酸激酶,分别为LysC,MetL,ThrA,使天冬氨酸磷酸化后分别进入Lys、Met、Thr的合成途径.因此大肠杆菌菌体中无法积累大量天冬氨酸.以大肠杆菌W3110为出

【作者】

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马怀远黄非白林含

【机构】

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四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室;

【出处】

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中国生物工程杂志

【发表日期】

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2004年期

【关键词】

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大肠杆菌W3110 Red同源重组基因敲除高效液相色谱 L-天冬氨酸

【基金项目】

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国家自然科学基金(30970043);四川省科技厅支撑计划省院科技合作项目(2013JZ0009)资助项目

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大肠杆菌中存在3种天冬氨酸激酶,分别为LysC,MetL,ThrA,使天冬氨酸磷酸化后分别进入Lys、Met、Thr的合成途径.因此大肠杆菌菌体中无法积累大量天冬氨酸.以大肠杆菌W3110为出发菌株,利用Red同源重组系统分别构建了LysC、ThrA和MetL单基因缺陷株和LysC-ThrA和LysC-MetL双基因缺陷株.采用高效液相色谱法测定L-天冬氨酸积累量.发现除MetL单基因突变株外,其余突变株均积累了比野生型更多的L-天冬氨酸,这为代谢工程改造菌株并通过发酵法生产天冬氨酸奠定了基础.

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