【摘 要】
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目的 构建人前列腺特异性膜抗原胞外区(edPSMA)真核表达质粒,并建立稳定表达edPSMA的小鼠前列腺癌(RM-1-edPSMA)的细胞株.方法 构建PcDNA 3.1(-)-edPSMA真核表达载体并测序,脂质体转染法分别将PcDNA 3.1(-)-edPSMA质粒和PcDNA3.1(-)空载质粒转染至RM-1细胞,G418筛选后获得了稳定生长的阳性克隆细胞株,逆转录.聚合酶链反应(RT-PC
【机 构】
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目的 构建人前列腺特异性膜抗原胞外区(edPSMA)真核表达质粒,并建立稳定表达edPSMA的小鼠前列腺癌(RM-1-edPSMA)的细胞株.方法 构建PcDNA 3.1(-)-edPSMA真核表达载体并测序,脂质体转染法分别将PcDNA 3.1(-)-edPSMA质粒和PcDNA3.1(-)空载质粒转染至RM-1细胞,G418筛选后获得了稳定生长的阳性克隆细胞株,逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测edPSMA蛋门的表达.结果 质粒经酶切测序,结果与Gene Bank序列进行Blast比对分析,同源性为99.7%,RT-PCR和Western blot均证明转染了 PcDNA 3.1(-)-edPS-MA质粒的RM-1细胞表达edPSMA.结论 成功构建了PcDNA 3.1(-)-edPSMA质粒,并建立了稳定表达edPSMA的细胞株。
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