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目的
比较3种不同方法培养大鼠结肠平滑肌细胞（CSMC）的生长情况。
方法分离大鼠末端结肠，剥离浆膜层和黏膜层获得平滑肌组织层，将平滑肌组织层剪成小块，采用3种不同方法原代培养大鼠CSMC：（1）贴壁法：将组织块直接接种于培养瓶中。（2）酶解法①：使用0.1% Ⅱ型胶原酶和0.01%大豆胰蛋白酶抑制剂消化组织块2次，然后接种于培养瓶中。（3）酶解法②：使用0.25%胰蛋白酶消化组织块，然后用0.1% Ⅱ型胶原酶和0.01%大豆胰蛋白酶抑制剂消化2次，接种于培养瓶中。按上述3种方法进行大鼠CSMC的原代培养，待细胞长成致密单层后进行传代，观察细胞生长情况并进行免疫荧光检测鉴定细胞类型。
结果贴壁法培养6 d可以见细胞从组织块周围游出，但由于细胞数少无法进行传代；酶解法①培养36 h可见少量细胞贴壁，培养15~20 d可以进行传代；酶解法②培养36 h可见较多细胞贴壁生长，培养10 d可以进行传代。酶解法①和酶解法②培养的细胞传代后，细胞形态和生长速度无明显区别。免疫荧光检测显示，3种方法培养的细胞均为α-平滑肌肌动蛋白阳性，90%以上为CSMC。
结论3种培养方法均可得到急性分离的大鼠CSMC，在细胞质量方面无明显差别，实验中可根据具体情况选用不同的培养方法。