6株铜绿假单胞菌噬菌体的分离及其生物学特性

来源 :兰州大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhusanhuiit
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目的分离铜绿假单胞菌噬菌体,比较其形态、裂菌特性并测定其裂解谱,根据裂解谱筛选出裂解百分比最高的噬菌体,并测定其最佳感染复数和体内代谢动力学等基本生物学特性。方法取兰州市区污水样品经0.22μm滤膜过滤,用双层琼脂平板培养法分离、纯化铜绿假单胞菌噬菌体并测定其裂解谱;纯化后的噬菌体进行扫描电镜观察;评估裂解谱后筛选出裂解百分比最高的为PaP106,分别按照感染复数(MOI)=10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7比例加入PaP106和铜绿假单胞菌共培养后测定噬菌体滴度,确定其最佳感染复数;不同途径(腹腔、肌肉、皮下)给小鼠注射1×1010pfu/m L PaP106 100μL,分别于0.5、1、3、6、12、24、36 h测定小鼠血液、肝脏、脾脏组织中噬菌体的浓度,分析噬菌体体内代谢动力学变化。结果共分离到6株形态不同的铜绿假单胞菌噬菌体,对铜绿假单胞菌耐药菌株的裂解百分比为25%—75%,其中PaP106噬菌体对铜绿假单胞菌耐药菌株的裂解百分比最高(75%),PaP106噬菌体的最佳感染复数为1×10-6,腹腔注射PaP106噬菌体后,其在血液、肝脏、脾脏的达峰时间短于皮下注射和肌肉注射途径。结论在分离得到的6株铜绿假单胞菌噬菌体中,PaP106噬菌体裂解性强、裂解谱宽,腹腔注射噬菌体后血液、肝脏、脾脏的分布及达峰时间最快,为今后临床治疗感染多重耐药铜绿假单胞菌提供了理论基础。
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