【摘 要】
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目的:探讨内质网应激途径在尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(antitumor component-Ⅰfrom Agkistro-don acutus venom,AAVC-Ⅰ)诱导人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡中的作用.方法:本实验选择人
【机 构】
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皖南医学院口腔医学院,芜湖241001 ,安徽;皖南医学院病理生理学教研室,芜湖241001 ,安徽
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目的:探讨内质网应激途径在尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(antitumor component-Ⅰfrom Agkistro-don acutus venom,AAVC-Ⅰ)诱导人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡中的作用.方法:本实验选择人舌鳞癌Tca8113细胞作为研究对象,体外条件下传代培养取对数生长期细胞进行实验.根据实验目的设为正常对照组、二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)阳性对照组和AAVC-Ⅰ 实验浓度组.MTT法检测不同浓度的DTT和AAVC-Ⅰ处理Tca8113细胞24 h后的增殖抑制作用并筛选合适的DTT阳性对照实验浓度和AAVC-Ⅰ实验浓度组,采用HE染色、Annexin V-FITC/PI双荧光染色法观察细胞凋亡情况,Western blot检测内质网应激葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、增强子结合蛋白同源蛋白(enhance-binding protein-homologous protein,CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达水平.结果:随着AAVC-Ⅰ实验浓度的增加,其对Tca8113细胞的增殖抑制作用增强(P<0.05),并观察到细胞皱缩变小间隙增大,胞核浓缩,细胞破碎,出现凋亡小体,凋亡率增高(P<0.05),蛋白GRP78、CHOP、Caspase-12、Caspase-9、Caspase-3表达水平上调(P<0.05).结论:在AAVC-Ⅰ诱导人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡中,内质网应激CHOP/Caspase-12途径发挥着正向调节作用.
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