【摘 要】
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目的:研究脂多糖(LPS)是否通过核因子κB, 即IκBα、 NF-κB p65途径引起腹膜间皮细胞(peritoneal mesothelial cells, PMC)凋亡、抑制细胞生长和诱导肿瘤坏死因子(TNF)的表
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院肾内科,辽宁,沈阳,110001
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目的:研究脂多糖(LPS)是否通过核因子κB, 即IκBα、 NF-κB p65途径引起腹膜间皮细胞(peritoneal mesothelial cells, PMC)凋亡、抑制细胞生长和诱导肿瘤坏死因子(TNF)的表达.方法:胰蛋白酶-EDTA消化法用于PMC的原代培养、传代, 经鉴定分组:①不同浓度LPS组(正常对照组、 0.1 mg/L、 1.0 mg/L、 10 mg/L、 50 mg/L、 100 mg/L);②不同时间组:LPS作用于PMC 0、 1、 3、 6、 12、 24 h.Hoechst33258染色法检测PMC的凋亡;MTT法检测PMC的生长增殖抑制情况;免疫荧光法检测p65的活性;Western blot检测IκBα的表达;用L929细胞株检测TNF的活性;RT-PCR检测TNFα mRNA的表达.结果:LPS抑制PMC生长并诱导凋亡、引起IκBα的降解、 p65的核移位;LPS诱导PMC表达TNF, 1 h TNF-α mRNA达最大值、 3 h TNF-α活性达最大值.结论:LPS可抑制PMC的生长及诱导凋亡;LPS诱导PMC表达TNF-α呈浓度依赖性, 在LPS作用早期TNF-α明显升高, 随后下降.这一过程中IκBα-NF-κB p65信号途径可能发挥了重要作用.
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