【摘 要】
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目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对大鼠原代培养的精原干细胞(SSC)早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF)、原癌基因c-Kit基因转录及表达的影响.方法 采用含不同浓度GDNF(
【机 构】
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华中科技大学同济医学院计划生育研究所,华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科,华中科技大学同济医学院协和医院骨科
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目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对大鼠原代培养的精原干细胞(SSC)早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF)、原癌基因c-Kit基因转录及表达的影响.方法 采用含不同浓度GDNF(0、10、50、100 ng/m1)的DMEM培养液原代培养大鼠SSC.RT-PCR检测SsC中PLZF mRNA、c-Kit mRNA水平,蛋白质印迹法检测PLZF、c-Kit蛋白表达情况.结果 对照组和GDNF 10 ng/nl组细胞随着培养时间延长,生长速度无明显变化,而GDNF 50和100 ng/ml组细胞生长速度明显加快.对照组PLZF和c-Kit mRNA表达量分别为0.28±0.13、0.65±0.21,GDNF 10 ng/ml组分别为0.27±0.14,0.62±0.19,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);GDNF 50 ng/ml组分别为0.64±0.28、0.34±0.15.与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);GDNF 100 ng/ml组分别为0.68±0.27、0.28±0.18,与50 ng/ml组比较差异无统计学意义(P＞0.05).对照组PLZF和c-Kit蛋白表达量分别为0.34+0.13、0.72±0.27 GDNF 10 ng/ml组分别为0.38±0.18、0.69±0.26,与对照组比较差异元统计学意义(P＞0.05);GDNF 50 ng/ml组分别为0.68±0.26、0.35±0.15,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);GDNF 100 ng/ml组分别为0.70±0.27、0.32±0.11,与50 ng/ml组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 随着GDNF浓度增加,SSC增殖水平升高,而分化受抑制.GDNF对SSC增殖和分化有一定的调控作用.
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