【摘 要】
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目的：设计并筛选针对人STAT1基因有效的RNA干扰靶点。方法：根据人STAT1基因序列,设计3个干扰序列,将oligo退火成双链并连接穿梭载体pLKO-1-EGFP-puro-shRNA,构建shRNA慢病毒载
【机 构】
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北京中医药大学东直门医院东区外科,北京中医药大学第三附属医院医务处,北京中医药大学东直门医院外科
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目的：设计并筛选针对人STAT1基因有效的RNA干扰靶点。方法：根据人STAT1基因序列,设计3个干扰序列,将oligo退火成双链并连接穿梭载体pLKO-1-EGFP-puro-shRNA,构建shRNA慢病毒载体质粒,并转化至感受态细胞DH5a,进行测序验证。在脂质体介导下转染293T细胞,包装生产慢病毒。慢病毒载体转染人肝癌细胞MHCC97L的STAT1过表达瘤株（MHCC97L-stat1）,用Real-timePCR检测干扰效果。结果：测序证实3个STAT1基因RNAi病毒载体质粒构建成功;慢病毒
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