【摘 要】
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目的:采用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立小鼠溃疡性结肠炎模型,观察清肠化湿方对肠炎小鼠的治疗作用,并探讨清肠化湿方通过吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)调节溃疡性结肠炎小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子表达平衡的相关机制.方法:将24只健康的SPF级雄性C57BL6/J小鼠随机分为空白组、模型组、清肠化湿方低剂量组[12 g/(kg·d)]和清肠化湿方高剂量组[24 g/(kg·d)].第1～13天,空白组自由饮用纯水,模型组小鼠
【机 构】
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南京中医药大学附属医院,江苏 南京 210029
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目的:采用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立小鼠溃疡性结肠炎模型,观察清肠化湿方对肠炎小鼠的治疗作用,并探讨清肠化湿方通过吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)调节溃疡性结肠炎小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子表达平衡的相关机制.方法:将24只健康的SPF级雄性C57BL6/J小鼠随机分为空白组、模型组、清肠化湿方低剂量组[12 g/(kg·d)]和清肠化湿方高剂量组[24 g/(kg·d)].第1～13天,空白组自由饮用纯水,模型组小鼠给予纯水灌胃,清肠化湿方低剂量组及高剂量组给予中药灌胃.实验第4天,模型组、清肠化湿方低剂量组及高剂量组小鼠给与2.5％DSS自由饮用,每日观察小鼠一般情况,记录小鼠体质量,粪便性状及便血情况,计算疾病活动指数(DAI)评分.采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学改变.实时荧光定量(RT-qPCR)法检测结肠组织RORγt、IL-17、IL-22、IL-23、Foxp3、IL-10、TGF-β、IDO1 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测结肠组织RORγt、Foxp3、IDO1蛋白表达.结果:清肠化湿方可有效治疗UC小鼠,降低小鼠DAI评分,增加结肠长度,改善病理损伤.qPCR结果显示,与模型组相比,清肠化湿方可有效降低UC小鼠结肠组织RORγt、IL-17、IL-22、IL-23 mRNA及IDO1 mRNA表达水平,促进Foxp3 mRNA表达,升高IL-10、TGF-βmRNA表达.Western Blot结果显示,UC小鼠给与清肠化湿方干预后,低剂量组RORγt、IDO1蛋白表达降低,Foxp3蛋白表达升高;高剂量组RORγt、IDO1蛋白表达降低,Foxp3蛋白表达显著升高.结论:清肠化湿方能够有效治疗溃疡性结肠炎,高剂量组治疗效果更明显,其机制可能与下调IDO1表达,调节Th17/Treg细胞因子表达平衡相关.
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