Fas靶向RNA干扰质粒载体的构建及生物活性鉴定

来源 :西安交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:zasakura
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目的构建Fas靶向的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Fas表达在急性再生障碍性贫血治疗中的意义奠定基础.方法 PCR法获得U6启动子序列以及产生siRNA的相应DNA模板序列,将其克隆入改造后的pcDNA3.1,获得RNA干扰载体pU6-siFas.脂质体法将pU6-siFas导入P815细胞,免疫组化法检测对P815细胞Fas表达的抑制情况.结果所构建的载体pU6-siFas能够干扰P815细胞中Fas的表达,并且具有新霉素抗性,能够用G-418筛选稳定转化的细胞株.结论成功构建了抑制小鼠Fas表达的RN
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