【摘 要】
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对Red重组系统介导下大肠杆菌进行遗传改造的转化条件、诱导条件、复苏条件三方面实验参数进行优化研究.结果表明：电转化加入的DNA为20ng,Red重组系统感受态细胞培养浓度为OD6
【机 构】
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广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心,广西大学生命科学与技术学院
【基金项目】
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广西科学院基本科研业务费资助项目“甘蔗渣生产丁醇技术和工艺研究”(08YJ16SW05);广西科学研究与技术开发计划项目“利用禾本纤维生产丁醇菌株的选育及其中试”(桂科攻0992022-1)资助
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对Red重组系统介导下大肠杆菌进行遗传改造的转化条件、诱导条件、复苏条件三方面实验参数进行优化研究.结果表明：电转化加入的DNA为20ng,Red重组系统感受态细胞培养浓度为OD600=0.60,所需的电击感受态细胞数为3×108;对大肠杆菌基因做双敲除时,突变第2个基因的阿拉伯糖诱导最适时间比突变首个基因延长,诱导浓度为40μm,复苏时间变化对体系影响不显著.
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