【摘 要】
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目的 应用M3受体蛋白多肽213-228(M3RP)免疫BALB/c小鼠.建立干燥综合征(SS)动物模型,以探讨M3RP在SS发病机制中的作用.方法 应用M3RP 100 μg配合等体积佐剂,于0,14,35,51 d
【机 构】
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北京大学人民医院风湿免疫科,100044
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目的 应用M3受体蛋白多肽213-228(M3RP)免疫BALB/c小鼠.建立干燥综合征(SS)动物模型,以探讨M3RP在SS发病机制中的作用.方法 应用M3RP 100 μg配合等体积佐剂,于0,14,35,51 d进行尾根部皮下注射给药免疫4周龄的BALB/c小鼠,以颌下腺匀浆作为阳性对照,谷胱甘肽转移酶(GST)及磷酸盐缓冲液(PBS)作为阴性对照.观察小鼠饮水量的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测不同时间点小鼠血清中的M3RP抗体、α-胞衬蛋白(α-fodrin)抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体,类风湿因子(RF)及抗核抗体(ANA)等自身抗体,并测定血清中自细胞介素(IL)-2,IL-10和干扰素(IFN)-γ.应用苏木素-伊红(HE)染色和免疫组织化学方法检测小鼠的颌下腺及腮腺的病理改变及α-胞衬蛋白的抗原分布.结果 ①M3RP免疫可诱导BALB/c小鼠血清自身抗体的产生.免疫前小鼠血清中的抗体均为阴性,而自初次免疫后第35天开始,在给予颌下腺匀浆及M3RP免疫的BALB/c小鼠中的M3RP抗体、α-胞衬蛋白抗体和ANA为阳性,而上述抗体在PBS和GST组为阴性.② M3RP免疫可导致BALB/c小鼠颌下腺淋巴细胞浸润和α-胞衬蛋白的表达.自初次免疫后第56天开始,予颌下腺匀浆及M3RP免疫的BALB/c小鼠的腺体中出现少量淋巴细胞浸润,且随时间的延长,淋巴细胞浸润逐渐加重;而应用PBS和GST免疫的小鼠腺体无明显的病理改变.应用α-胞衬蛋白多抗免疫组织化学的方法检测颌下腺匀浆及M3RP免疫的BALB/c小鼠的颌下腺组织有α-胞衬蛋白表达,而PBS和GST组为阴性.③M3RP免疫可使BALB/c小鼠血清IFN-γ和IL-2水平升高.IFN-γ和IL-2在给予颌下腺匀浆及M3RP免疫后较对照组明显升高(P
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