目的 对双扩增法RNA恒温扩增技术进行方法学性能评价.方法 选取2020年5—9月因呼吸道感染就诊于上海中医药大学附属第七人民医院患者的咽拭子标本40例(含经聚合酶链反应荧光探针法判定的甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒、肺炎支原体和肺炎衣原体7种病原体阳性标本各5例,阴性标本5例),通过检测对比评价双扩增法检测7种常见呼吸道病原体RNA的准确性、灵敏度、重复性、交叉反应及抗干扰性能力.结果 对已知结果的40例呼吸道咽拭子标本进行7种病原体双扩增法检测,检测结果与原诊断结果一致,准确性100％;对稀释后的LOD1、LOD2和LOD33个梯度的灵敏度样品进行检测,各病原体灵敏度验证结果符合要求;7例病原体阳性标本和1例阴性标本每天分别重复检测3次,连续重复检测5 d,与原诊断结果一致,符合率100％;7种病原体之间及7种病原体与其他多种病原体之间无交叉反应;2 g/L的血红蛋白和1％(W/V)的黏蛋白对病原体检测结果无干扰.结论 双扩增法检测RNA的准确性、灵敏度、重复性、交叉反应及抗干扰性能力均符合要求,具有准确、速度快、通量高等优点,是临床实验室病原体测定的可靠方法.