短发卡样RNA抑制c-myc癌基因在乳腺癌细胞中的过度表达

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目的构建人c-myc癌基因特异性短发卡样RNA(shRNA)真核表达载体,抑制靶基因c-myc在乳腺癌细胞中的过度表达.方法设计有小发夹结构的三条寡核苷酸序列,克隆至空载体pEGFP-C1/U6中构建重组体并体外转染乳腺癌细胞株MCF-7,48 h后分别用RT-PCR和Western blot方法检测胞内c-myc癌基因mRNA水平和蛋白水平.结果①成功构建shRNA真核表达载体;②shRNA表达载体转染MCF-7细胞48h后,pEGFP-C1/U6-2能明显下调胞内c-myc mRNA水平和蛋白水平(P
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