猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣA基因特异片段的克隆和表达

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xjwyx770729

【摘要】

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以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25-4株基因组DNA为模板，PCR方法扩增apxⅣA特异片段，PCR产物经纯化后与载体PMD18-T进行连接、转化，经酶切及序列分析鉴定后，亚克隆到原

【作者】

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彭永刚刘思国王牟平宫强王春来沈国顺

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2004年2期

【关键词】

：

猪胸膜肺炎放线杆菌分泌蛋白载体克隆表达 apxⅣA actinobacillus pleuropeumoniae prokaryotic expres

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以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25-4株基因组DNA为模板，PCR方法扩增apxⅣA特异片段，PCR产物经纯化后与载体PMD18-T进行连接、转化，经酶切及序列分析鉴定后，亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中，构建成重组表达质粒pGEX-apxⅣA，转入到大肠杆菌B121中，以IPTG进行诱导，进行SDS-PAGE电泳。结果表明，25-4株apxⅣAgene与基因库中标准7型apxⅣA gene同源性达97％，所表达的融合蛋白相对分子量为44kD，与实际预测相符。apxⅣA毒素特异片段的成功

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