【摘 要】
：
以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行
论文部分内容阅读
以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能
其他文献
根据GenBank中猪Ⅱ型圆环病毒(PCV-2)基因序列,设计两对特异性引物.将PCV-2广东分离株(GD1株)用PK15细胞系培养,从细胞培养物中提取病毒总DNA并以之为模板,用PCR方法分段扩增
从健康仔猪前腔静脉无菌采血,分离外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,用猪γ干扰素(IFN-γ)基因特异性引物通过RT-PCR扩增猪IFN-γ的全长cDNA序列,将其克隆到pMD18-T载体中,再
根据GenBank中A／Swine／Hong Kong/126／82(H3N2)株猪流感病毒(SIV)NP基因核苷酸序列设计合成一对引物，经RT-PCR扩增了我国SIV分离株A／Swine/Heilongjiang／3／2000(H3N2)的核蛋白(NP)基
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型7型25-4株ApxⅡCA基因用特异性引物进行PCR扩增并克隆到T载体上，构建重组质粒pMD18-ApxⅡCA，将pMD18-ApxⅡCA转化到E．coliJM83中并测序。序列分
1病原简介猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的，以母猪的繁殖障碍、哺乳仔猪的高死亡率及呼吸症状
根据GenBank中发表的GPMV SF02株的NP基因的核苷酸序列设计合成一对引物,采用RT-PCR扩增出与预期设计的1470bp大小相符的片断,将此扩增产物克隆入PMD18-T载体,进行序列测定和
将除去3'端跨膜区的猪瘟病毒E2基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,获得重组质粒pFBHT-E2,转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,发生转座作用,经抗性及蓝白
克隆了分离自七彩纹鸟的禽副粘病毒2型F4分离株F基因的全长，对它的生物特性进行了较为详细的研究，并试图通过与标准株Yucaipa株进行全面的比较，探讨该变异株的变异情况。研究结
参考GenBank番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus，MDRV)Sl基因序列设计合成一对引物，对番鸭呼肠孤病毒MW9710株S1基因进行RT-PCR扩增，并对PCR产物进行了克隆和测序。结果显示
以猪轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了2331bp的VP4全基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T Vector中,成功地构建出克隆质粒pGEM-T-VP