【摘 要】
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目的 研究替莫唑胺(TMZ)对胶质瘤干细胞(GSC)错配修复基因hMLH1和hMSH2的影响及其与TMZ耐药的相关性.方法 采用悬浮培养法分离培养GSC株.免疫荧光法检测CD133、Nestin和GFAP.细胞毒性实验计算TMZ半数抑制浓度(IC50).甲基化特异性PCR(MSP)和Western blot分别检测hMLH1和hMSH2基因启动区甲基化和蛋白表达.结果 (1)从U251和A172胶
【机 构】
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100069北京,首都医科大学,首都医科大学附属北京天坛医院,首都医科大学附属北京天坛医院,北京市神经外科研究所,清华大学玉泉医院,100069北京,首都医科大学,湖北省新华医院
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目的 研究替莫唑胺(TMZ)对胶质瘤干细胞(GSC)错配修复基因hMLH1和hMSH2的影响及其与TMZ耐药的相关性.方法 采用悬浮培养法分离培养GSC株.免疫荧光法检测CD133、Nestin和GFAP.细胞毒性实验计算TMZ半数抑制浓度(IC50).甲基化特异性PCR(MSP)和Western blot分别检测hMLH1和hMSH2基因启动区甲基化和蛋白表达.结果 (1)从U251和A172胶质瘤细胞系中成功分离胶质瘤干细胞株U251g和A172g.(2)U251g和A172g的IC50分别为1 695.41 μmol/L和724.63μmol/L.以IC50、150％IC50两种浓度对U251g和A172g诱导培养1周后对应U251g-1、U251g-2和A172g-1、A172g-2,IC50各为1 913 μmol/L、2 555 μmol/L和754 μmol/L、1 549 μmol/L.(3)诱导后的U251g和A172g的hMLH1基因启动区发生异常甲基化和蛋白表达缺失,且A172g的甲基化水平随药物浓度的增加而增高;诱导后的U251g和A172g的hMSH2基因启动区未发生甲基化和蛋白表达缺失.结论 GSC存在于U251和A172细胞系中,对TMZ不同程度耐药.TMZ诱导下,胶质瘤干细胞U251g和A172g错配修复系统功出现异常,主要表现为hMLH1基因启动区甲基化和蛋白表达缺失。
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由中华医学会、中华医学会神经外科学分会主办，浙江省医学会和浙江大学附属医院承办的中华医学会神经外科学分会第十一次全国学术大会将于2012年10月11—14日在浙江杭州市举行。本次会议是神经外科分会第六届委员会组织召开的第一次全国性学术会议，欢迎全国神经外科和相关学科同仁参会。
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