【摘 要】
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目的:比较Lipo2000、磷酸钙法和Lonza电转法转染乙型肝炎病毒X(HBx)基因的表达质粒pHAHBx至HepG2肝癌细胞的转染效率及其细胞毒性。方法:分别用Lipo2000、磷酸钙法和Lonza电
【基金项目】
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内蒙古医学院2011科技百万工程资助项目(NY2011bw004);内蒙古卫生厅医疗卫生科研计划资助项目(2010038);内蒙古医学院外科博士点立项建设一般资助项目(NYFYZDBJ2010003);内蒙古自治区高等学校科学研究资助项目(NJZY13416)
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目的:比较Lipo2000、磷酸钙法和Lonza电转法转染乙型肝炎病毒X(HBx)基因的表达质粒pHAHBx至HepG2肝癌细胞的转染效率及其细胞毒性。方法:分别用Lipo2000、磷酸钙法和Lonza电转法将绿色荧光蛋白(GFP)标记的pHA-HBx转染至HepG2肝癌细胞,以荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR鉴定HBx基因在HepG2细胞基因组的整合,Annexin V/PI法检测细胞的存活情况。结果:RT-PCR结果显示,外源性HBx基因通过3种转染方法均可导入HepG2细胞并表达;Lipo2000和Lonza电转法的转染效率均高于磷酸钙法(均P<0.05),而Lipo2000和Lonza电转法的转染效率间差异无统计学意义(P>0.05);细胞存活率从高到低依次为Lonza电转法、Lipo2000、磷酸钙法(均P<0.05)。结论:Lonza电转法转染pHA-HBx至HepG2肝癌细胞转染效率高,且细胞毒性小,是较好的转染方法。
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