根结线虫雌虫ISSR-PCR反应体系的建立与优化

来源 :中国植保导刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:skoda0412
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
以根结线虫雌虫DNA为基础,建立和优化稳定的ISSR-PCR反应体系。试验采用5因素、4水平的正交试验和单因子梯度优化相结合的方法。通过试验得到适用于根结线虫雌虫的25μL ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为dNTPs 0.24 mmol/L、Mg2+2.1 mmol/L、Taq酶0.4 U、引物0.3μmol/L、DNA 140 ng。经引物UBC835、UBC857对根结线虫雌虫最佳ISSR-PCR反应体系验证。该反应体系稳定、可靠,正交结合单因子试验可以建立满足后续试验要求的ISSR-PCR体系。 Based on the root-knot nematode female DNA, a stable ISSR-PCR reaction system was established and optimized. The experiment used a combination of 5-factor, 4-level orthogonal experiment and single-factor gradient optimization. The optimal concentration of 25 μL ISSR-PCR reaction system for female M. incognita was 0.24 mmol / L dNTPs, 2.1 mmol / L Mg2 +, 0.4 U Taq DNA polymerase, 0.3 μmol / L primer, DNA 140 ng. The best ISSR-PCR reaction system of root-knot nematode was verified by primers UBC835 and UBC857. The reaction system is stable and reliable. The orthogonal combined single factor test can establish the ISSR-PCR system that meets the requirements of subsequent experiments.
其他文献
采用快速溶剂萃取(ASE)萃取油漆中短链的氯化石蜡,浓硫酸磺化,弗罗里硅土柱净化,气相色谱-电子捕获检测器(GC-ECD)进行检测.优化了快速溶剂萃取的条件,如萃取溶剂、萃取温度,
以脱水污泥为主要原材料,辅以粉煤灰和粘土,采用新型弧叶型旋转窑工艺烧制轻质陶粒是一种有效的污泥处置方法。对采用弧叶型旋转窑烧结污泥陶粒的工艺参数进行优化研究,分析了不同烧成工艺对陶粒的颗粒强度、表观密度、堆积密度、1 h吸水率等性能指标的影响。结果显示:烧结温度是影响陶粒产品性能的关键因素。试验还获取了在实验室范围内弧叶型旋转窑烧制污泥陶粒的最佳烧制工艺:将坯料于105℃下烘烤脱水2~3 h,取出
降低烟碱含量、优质多抗、香气品质好为烤烟育种主攻目标,以MS8610-711为母本,X-347为父本选育出雄性不育杂交种YH05.该杂交种株型筒型,田间生长势强,耐成熟,分层落黄好,大田
采用精准温度计,分别于春夏两季,对丹参垄作和平作0~25cm土壤温度进行了24h连续观测.结果表明:丹参垄作不仅提高了地温,更显著地提高了日有效积温和温差,有利于丹参根系生长;不
利用环氧氯丙烷与二甲胺盐酸盐在碱性条件下反应,生成环氧丙基三甲基氯化铵中间体.根据环氧值和转化率确定了制备中间体的最佳工艺条件:n(环氧氯丙烷)∶n(三甲胺盐酸盐)1.0∶
中稻1号由中国农业科学院作物科学研究所和江苏省连云港市农业科学院合作选育而成,来源于中粳1319//连96~1/中粳8415,属粳型常规水稻。阐述了中稻1号品种特征特性、机插生育特
采用白腐真菌去除阳离子红GTL,考察了温度、投菌量、阳离子红GTL浓度、pH、葡萄糖投加量等因素对阳离子红GTL去除效果的影响.结果表明、白腐真菌对阳离子红GTL的最佳降解条件
目的 了解γ-谷氨酰羧化酶(γ-glutamine carboxylase,GGCX)基因多态位点rs11676382在新疆维吾尔族、汉族人群中的分布情况及其关联性.方法 以维吾尔族、汉族获得华法林稳定
开展高钙植物桤叶唐棣引种试验研究,目的是了解该浆果树种在黑龙江省东部地区的适应性,从而为黑龙江省浆果和林业发展增添新的经济树种和绿化树种,为地方经济引入一个新的增
目的 研究SIP1 (smad-interacting protein 1)基因在先天性巨结肠症(Hirschsprung Disease,HD)中的表达情况,探讨SIP1与HD发病的关系.方法 利用荧光实时定量PCR(quantitativ