评价海马细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)在外源性一氧化碳(CO)改善失血性休克复苏大鼠认知功能中的作用。
方法清洁级健康雄性SD大鼠90只，9～10周龄，体重350～400 g，采用随机数字表法分为5组(n＝18)：假手术组(S组)、失血性休克复苏组(H组)、CO组(CO组)、PD98059-CO组(PCO组)和PD98059组(P组)。失血性休克通过股静脉放血至MAP为25～35 mmHg维持60 min，将收集的血液在15 min内回输体内达到初始血压水平作为复苏，必要时输注生理盐水，建立失血性休克复苏模型；CO组复苏结束后立即将大鼠置于含有1%CO混合空气的玻璃箱内3 h；PCO组和PC组放血前30 min时脑室内注射ERK1/2抑制剂PD98059(30 μmol/L)30 μl；S组只进行股静脉、股动脉穿刺置管和脑室内注射生理盐水。于复苏结束后3 h时处死大鼠取海马，采用气相分析法测定海马CO含量；于复苏结束后第15天时采用Morris水迷宫实验评价认知功能，随后处死取海马，TUNEL联合活化caspase-3免疫荧光法测定海马CA1区细胞凋亡率；于复苏结束后6 h时处死大鼠取海马，采用Western blot法检测磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、Bcl-2和Bax表达。
结果与S组比较，H组、PCO组和P组逃避潜伏期延长，H组、CO组、PCO组和P组海马CO含量增加，神经细胞凋亡率升高，活化caspase-3和p-ERK1/2表达上调，Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05)；与H组比较，CO组逃避潜伏期缩短，海马CO含量增加，神经细胞凋亡率降低，活化caspase-3表达下调，p-ERK1/2表达上调，Bcl-2/Bax比值升高，P组逃避潜伏期延长，海马CO含量减少，神经细胞凋亡率升高，活化caspase-3表达上调，p-ERK1/2表达下调，Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)；与CO组比较，PCO组逃避潜伏期延长，神经细胞凋亡率升高，活化caspase-3表达上调，p-ERK1/2表达下调，Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05)。
结论外源性CO改善失血性休克复苏大鼠的认知功能，与增加海马神经细胞ERK1/2磷酸化水平，抑制神经细胞凋亡有关。