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目的：利用抗性互补策略提高Red重组介导的体内直接克隆效率。方法：将抗性基因（如cat）拆分为互补的两部分Cma、Cmb（部分与Cma同源）,这两部分单独均不具有抗性,仅当融合在一起时才有抗性。首先将Cmb定向整合到染色体上拟克隆区域的一侧,然后将含有Cma的线性质粒载体电转到细胞内进行定向克隆。结果：使用该方法,我们成功地将大肠杆菌DH1基因组上约48 kb的大片段DNA克隆到质粒载体上。结论：该方法可用于大片段DNA的功能研究。