【摘 要】
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目的 探讨再灌注损伤对大鼠肝细胞凋亡的影响,Mel对大鼠肝再灌注细胞凋亡的影响作用及其机制.方法 150只健康雄性Wistar大鼠(质量190～210 g,6～7周龄),随机分为褪黑素处理组(Mel
【机 构】
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中国医科大学附属第二医院,沈阳市第一人民医院
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目的 探讨再灌注损伤对大鼠肝细胞凋亡的影响,Mel对大鼠肝再灌注细胞凋亡的影响作用及其机制.方法 150只健康雄性Wistar大鼠(质量190～210 g,6～7周龄),随机分为褪黑素处理组(Mel)、酒精溶媒对照组(Alc)和生理盐水对照组(NS).建立肝缺血再灌注损伤模型,缺血均为60 min,之后每组分别按再灌注后0.5、1、6、12及24 h采集标本.M组(20 mg/kg)于缺血前30 min腹腔注射melatonin;A组采取与Mel组相同浓度的酒精液,N组则注射同比例的生理盐水.测定血清天门冬酸氨基转移酶(AST)进行测定;对肝组织进行Bcl-2及Bax免疫组化染色;并在此基础上进行透射电镜观察肝细胞核及细胞器.结果 Mel组在再灌注后的6及12 h时点AST均显著低于Alc及NS对照组(aP＜0.05),且Alc组与NS组相比差异无显著性.Mel组在再灌注后各时点的Bcl-2染色的阳性细胞率显著高于Alc及NS对照组(aP＜0.05),且各时点内Alc组与NS组相比差异无显著性.Mel组在再灌注后1,6,12及24h时点的Bax染色的阳性细胞率显著低于Alc及NS对照组(cP＜0.05),且各时点内Alc组与NS组相比差异无显著性.Mel组再灌注后6,12及24 h的Bcl-2/Bax值显著高于Alc组和NS组(aP＜0.05),且上述每时点内的Alcohol组与N.S.组相比差异无显著性.电镜观察结果在Alcohol组及N.S对照组发现了普遍的肝细胞凋亡现象,相同时点Mel组则未发现肝细胞凋亡的发生.结论 外源性Mel可以抑制再灌注后血清天门冬酸氨基转移酶(AST),增强肝细胞Bcl-2蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,通过提升Bcl-2/Bax值来抑制再灌注后肝细胞凋亡的发生.
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