【摘 要】
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目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF)促进内皮细胞血管新生的机制及其参与的信号通路,为抗多发性骨髓瘤血管生成的研究提供新的实验依据.方法 以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为对
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目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF)促进内皮细胞血管新生的机制及其参与的信号通路,为抗多发性骨髓瘤血管生成的研究提供新的实验依据.方法 以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为对象,采用Western blot印迹法检测细胞内磷酸化丝/苏氨酸激酶(AKT)、内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)蛋白质的表达;采用Transwell小室迁移实验、小管形成实验评价体外内皮细胞血管新生的能力,小鼠体内Matrigel plug实验评估体内内皮细胞血管新生的能力,采用硝酸还原酶法检测HUVEC上清中内皮细胞源性一氧化氮(eNO)的含量,FITC-Annexin V/PI双染色流式细胞术分析细胞凋亡.结果 BDNF以时间-浓度依赖性的方式激活PI3K/AKT/eNOS信号通路,应用PI3K激酶抑制剂Ly294002可以明显阻断BDNF刺激后内皮细胞eNO的生成.在体外,BDNF诱导的细胞迁移和小管形成效应均分别能被Ly294002和L-NAME(NOS抑制剂)阻断;而BDNF的抑制凋亡效应与L-NAME无关,仅受Ly294002影响;在体内,经L-NAME喂养的小鼠皮下Matrigel栓中的新生血管数量与未经L-NAME喂养的小鼠相比显著减少.结论 BDNF通过AKT/eNOS途径活化介导血管新生,这可能成为治疗多发性骨髓瘤血管新生的新靶点.
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