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目的 观察含弓形虫顶膜抗原1 (TgAMA1)和棒状体颈部蛋白2(TgRON2) T、B细胞抗原表位的多肽鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫病免疫保护作用. 方法 化学方法合成含有经生物信息学预测的TgAMA1和TgRON2T细胞和B细胞表位多肽.5周龄BALB/c小鼠48只随机分为AMA1组、RON2组、A1+R2组和对照组(n=12),分别用AMA1 30 μg、RON2 30 μg或(A1+R2)各15 μg鼻内免疫,对照组用20 μl生理盐水滴鼻,共免疫3次,间隔2周.末次免疫后2周,采用ELISA法检测血清抗体水平;处死小鼠,取鼻、膀胱和肠道洗液,ELISA法检测SIgA水平;无菌取脾,制备脾细胞悬液,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测淋巴细胞培养上清细胞因子水平;取肝、脑组织,计数速殖子虫荷,以评价免疫诱导的黏膜及系统免疫应答和抗弓形虫感染保护作用. 结果 用AMA1和RON2多肽免疫小鼠可诱导产生高水平的特异性抗体反应和淋巴增殖反应.肽免疫小鼠血清特异性IgA、总IgG、IgG1和IgG2a水平均高于对照组(P＜0.05或P＜0.01),其中A1+R2组最高.小鼠脾淋巴细胞刺激指数(SI)显示,AMA1组(1.171±0.116)、RON2组(1.362±0.110)和A1+R2组(1.941±0.162)高于PBS组(0.743±0.081)(P＜0.05或P＜0.01),A1+R2组亦高于单肽组(P＜0.05).肽免疫小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-2和IL-4水平显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.01).肽免疫诱导了小鼠高水平的黏膜免疫应答,肽免疫小鼠鼻腔、膀胱和小肠冲洗液SIgA水平均显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.01).肽免疫小鼠获得部分抗弓形虫感染保护作用,与对照组比较,肽免疫小鼠肝和脑中速殖子负荷显著降低,减虫率分别为A1+R2组55.79％和55.68％、AMA1组52.36％和46.46％、RON2组40.02％和47.33％(P＜0.05或P＜0.01). 结论 含有T和B细胞表位的AMA1和RON2肽是一种有效的抗弓形虫病候选抗原,鼻内免疫小鼠可诱导强烈的黏膜和系统免疫应答,两种抗原表位肽联合使用的免疫效应比单用AMA1或RON2更强,抗弓形虫病作用更显著.