本研究探讨circ0000601对结直肠癌细胞增殖的影响及其可能的作用机制。
方法微阵列扫描结直肠癌组织和癌旁正常组织差异性表达的circRNA.PCR检测circ0000601在结直肠癌组织、癌旁正常组织及结直肠癌细胞株中的相对表达。在结直肠癌细胞中转染circ0000601 mimic上调circ0000601的表达，CCK-8检测结直肠癌细胞株增殖能力，通过生物信息学软件分析circ0000601的下游miRNA，双荧光报告基因法进行验证。转染miR-31-5p inhibitor抑制miR-31-5p的表达，CCK-8检测结直肠癌细胞株增殖能力。通过生物信息学数据库miRBase预测miR-31-5p的靶基因，通过荧光素酶报告基因法证实NUMB是miR-31-5p的靶基因。转染miR-31-5p mimic过表达miR-31-5p，检测结直肠癌细胞中NUMB蛋白表达水平。过表达circ0000601检测NUMB mRNA的表达。
结果通过t检验及Kruskal-Wallis检验分析数据。circ0000601在结直肠癌组织中的表达水平低于配对正常组织，过表达circ0000601可抑制直肠癌细胞增殖。circ0000601可与miR-31-5p靶向结合。通过miR-31-5p inhbitor下调miR-31-5p的表达可显著抑制结直肠癌细胞的增殖。使用miRBase预测miR-31-5p的靶基因，荧光素酶报告基因法证实NUMB是miR-31-5p的靶基因。过表达miR-31-5p后NUMB mRNA和蛋白的表达水平均降低。过表达circ0000601后NUMB mRNA表达水平增高。
结论circ0000601可通过miR-31-5p调控NUMB抑制结直肠癌细胞增殖，circ0000601可作为结直肠癌患者的潜在治疗靶点。