γ干扰素体外诱导骨髓间充质干细胞的IDO表达及其免疫调节作用

来源 :中华器官移植杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hyc20008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 探讨γ干扰素(IFN-γ)体外诱导作用成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的吲哚胺2,3-过氧化酶(IDO)的表达及IDO对异基因T淋巴细胞增殖的影响.方法 从人骨髓中分离、培养MSCs,观察传代3次以上的细胞形态,应用流式细胞术检测其表面标志,以鉴定其纯度.分别用浓度为0、20、50、100、200 U/ml的IFN-γ诱导作用MSCs后,以逆转录聚合酶链反应检测IDO mRNA的表达,蛋白印迹法检测IDO蛋白的表达,反相高效液相色谱法检测色氨酸的特异代谢产物犬尿氨酸的特异代谢率,以此判断IDO的活性.以丝裂霉素C灭活的外周血单个核细胞为刺激细胞,异基因T淋巴细胞为反应细胞,与经200 U/ml IFN-γ作用的MSCs组成混合淋巴细胞培养体系,MSCs与反应细胞的比例分别为1:5、1:10、1:50及1:100,部分混合淋巴细胞培养体系中加入IDO的特异性抑制剂1-甲基色氨酸(1-MT),检测T淋巴细胞增殖率及培养体系中IDO活性.结果 MSCs培养传代3代以后的纯度达到95%.在无IFN-γ作用时,MSCs没有IDOmRNA表达,经不同浓度的IFN-γ诱导后,均可检测到IDO mRNA表达,且表达强度呈IFN-γ剂量依赖性;IDO蛋白的表达与IDOmRNA一致;随着IFN-γ浓度的增加,MSCs培养上清液中的色氨酸浓度降低,而犬尿氨酸浓度升高.在无MSCs的混合淋巴细胞培养体系中,T淋巴细胞的增殖率为(80.2±5.7)%,当MSCs与反应细胞之比为1:5、1:10、1:50及1:100时,T淋巴细胞的增殖率分别为(28.1±3.2)%、(38.6±4.0)%、(57.2±2.5)%和(84.1±4.6)%,若在相同的混合淋巴细胞培养体系中加入1-MT,则MSCs对T淋巴细胞增殖的抑制作用基本消失;培养体系中IDO的活性与MSCs的数量成正比.结论 γ干扰素在体外能诱导MSCs的IDO表达,其表达水平与γ干扰素呈剂量依赖性;IDO能抑制T淋巴细胞增殖。

其他文献
多米诺肝移植(Domino liver transplantation,DLT)是指某些需要进行肝移植的疾病中,肝脏仅仅因为遗传缺陷导致全身系统性疾病,但是肝脏本身解剖结构正常,功能良好,将其切除的肝脏作为供肝,移植给另一受者的手术.这个过程类似多米诺骨牌,因此得名。
期刊
目的 探讨采用内镜与病理检查监测亲属活体供小肠移植术后并发症的意义.方法 2005年1月11日为1例诊断为小肠切除术后短肠综合征的患者进行亲属活体供小肠移植术,供者为受者的母亲.术后采用肠镜和病理检查监测受者移植术后并发症.结果 小肠移植术后37 d,内镜监测和病理活检发现急性排斥反应,术后65 d时病理活检发现巨细胞病毒感染.给予激素冲击、OKT3抗排斥治疗,结合更昔洛韦、阿昔洛韦抗病毒治疗,患
肝移植是目前治疗终末期肝病的有效方法,随着肝移植技术的进步,肝移植的成功率和移植肝的存活率均明显提高.目前,供肝的缺乏及不确定性已逐渐成为阻碍肝移植发展的最大障碍.Freeman等[1]研究了20世纪90年代美国肝移植的发展情况,发现进行尸体肝移植的病例增加了46%,由于技术的进步,存活率有效提高了5%,但是等待肝移植的时间却增加了46.5%,在等待肝移植的过程中,死亡病例增加了2倍。
期刊
目的 揭示人单核细胞共刺激分子在异种免疫反应中的表达及其作用机制.方法 从猪的主动脉分离血管内皮细胞(PEC)并培养扩增;从人单个核细胞(PBMC)中纯化CD4+T淋巴细胞和单核细胞.建立PEC和人PBMC混合培养体系,培养后收集细胞,然后加入荧光标记的单克隆抗体,通过流式细胞术检测CD14+单核细胞表面共刺激分子表达情况.为了检测淋巴细胞增殖反应以及阻断共刺激分子对PEC免疫反应的作用,在PEC
3.恶性肿瘤:2004年的一项研究表明,采用抗淋巴细胞抗体诱导治疗能使发生移植后淋巴细胞增殖性疾病(PTLD)的相对危险(RR)增加(RR=1.78,P<0.01),但与新生肿瘤的发生可能无关(RR=1.07,P>0.05)。
期刊
患者,男性,38岁,因"慢性肾炎,尿毒症"入院.行规律性血液透析2周.于2002年9月11日行亲属活体供肾肾移植术.供者为受者的同胞姐姐,40岁.供、受者血型均为O型,HLA-A、B、DR抗原无错配,受者群体反应性抗体(PRA)阴性,淋巴细胞毒交叉配合试验(CDC)为2%.供肾热缺血时间为5 min,二次热缺血时间为5 min,冷缺血时间为7 h.将供者左肾移植于受者右髂窝,供肾静脉与受者的右髂外
期刊
目的 总结肝移植术后并发消化道穿孔的临床特点及诊疗体会.方法 6例肝移植患者术后并发消化道穿孔,其中4例既往有腹部手术史.穿孔诊断时间在肝移植后7~12 d,确诊前2~4 d均有突发性腹部疼痛,但均能耐受,仅有1例腹痛较明显,上中腹压痛及反跳痛,其余5例腹肌不紧张,反跳痛不明显,6例均无明显的寒战及高热,5例的引流物细菌培养发现屎肠球菌感染,另1例未行引流物细菌培养.诊断明确后在全身麻醉下施行剖腹
目的 总结活体供肝者术后门静脉血栓形成的诊治体会.方法 2名活体供肝者,术前螺旋CT评估门静脉分型为B型门静脉和A型门静脉,经估算,残肝体积分别为全肝体积的33%和36%,均切取带肝中静脉的右半肝.术后早期丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素升高,腹腔引流液较多,呈腹水样,超声波检查提示门静脉血栓形成,并经增强螺旋CT明确诊断.供者1急诊行探查术,阻断门静脉血流,拆除闭合残端缝线,将门静脉切断,切除狭
目的 探讨早期生长反应因子-1(EGR-1)在移植肺缺血再灌注过程中的炎症损伤作用.方法 选择SD大鼠作为供、受者,建立左肺移植模型.实验分为4组:再灌注1 h组、再灌注2 h组和再灌注4 h组,移植后对移植肺分别进行1、2和4 h的再灌注;选取未进行移植和再灌注的供肺作为对照组.采用荧光定量实时聚合酶链法检测各组肺组织中EGR-1和白细胞介素(IL)-1β mRNA 的相对表达量,并检测支气管肺
环孢素A(CsA)或他克莫司(FK506)联合抗增殖免疫抑制剂和皮质类固醇的免疫抑制方案可获得较低的急性排斥反应(AR)发生率和较好的移植物存活率。但移植物功能的长期消耗以及免疫抑制剂的副作用成为影响移植物存活的主要问题,钙调磷酸酶抑制剂(CNI)的肾毒性是引起移植肾长期损害的主要因素之一。霉酚酸酯(MMF)和西罗莫司(SRL)的出现使撤除CNI或避免使用CNI或皮质类固醇成为可能。美国赫维希(H
期刊