【摘 要】
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N-糖基化对病毒的感染与增殖均具有重要作用,与PCV2复制相关的Rep蛋白含有三个N-糖基化位点。为了分析PCV2Rep蛋白N-糖基化位点突变对病毒复制的影响,本试验构建了三个双拷贝
【机 构】
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青岛农业大学动物科技学院; 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室; 山东省农业科学院畜牧兽医研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金项目(31201889);山东省现代农业产业技术体系疫病控制岗位(SDAIT-06-021-07);山东省科技发展计划(2014GNC111011);山东省农业科学院青年英才培养计划;山东省农业科学院青年科研基金项目(2014QNM40)
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N-糖基化对病毒的感染与增殖均具有重要作用,与PCV2复制相关的Rep蛋白含有三个N-糖基化位点。为了分析PCV2Rep蛋白N-糖基化位点突变对病毒复制的影响,本试验构建了三个双拷贝突变体感染性克隆2M23、2M256、2M286,并成功拯救病毒。通过间接免疫荧光检测病毒的拯救效果,TCID50测定病毒的感染力,荧光定量PCR检测细胞病毒的载量。结果显示,PCV2Rep蛋白的23~25aa、256~258aa N-糖基化位点突变后降低病毒的复制能力,而286~288aa突变后增强病毒的复制能力,为进一步阐明PCV2的复制及致病机制提供参考。
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