【摘 要】
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目的探讨微小RNA-206(miR-206)对前列腺癌细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期素G相关蛋白激酶(GAK)表达的干扰作用及对前列腺癌细胞生长的影响。方法前列腺癌细胞株DU-145和PC-3为转染对象，转染miR-NC为对照组，转染miR-206为实验组。荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测CDK4和GAK mRNA的表达水平。Western blotting检测CDK
【机 构】
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435000 鄂东医疗集团黄石市中心医院（湖北理工学院附属医院）泌尿外科 肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室,435000 鄂东医疗集团黄石市中心医院（湖北理工学院附属医院）泌尿外科 肾脏疾病发生与干
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目的探讨微小RNA-206(miR-206)对前列腺癌细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期素G相关蛋白激酶(GAK)表达的干扰作用及对前列腺癌细胞生长的影响。
方法前列腺癌细胞株DU-145和PC-3为转染对象，转染miR-NC为对照组，转染miR-206为实验组。荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测CDK4和GAK mRNA的表达水平。Western blotting检测CDK4和GAK蛋白的表达水平。流式细胞术检测细胞周期分布。EdU增殖实验和集落形成实验检测细胞增殖能力。
结果在DU-145和PC-3细胞株中，miR-NC组CDK4 mRNA表达量分别为1.00±0.09、1.00±0.10，GAK mRNA表达量为1.00±0.05、1.00±0.06；与之相比，两细胞株miR-206组中CDK4 mRNA表达明显下降，分别为0.36±0.18(t＝6.572，P＝0.001)、0.43±0.17(t＝5.794，P＝0.001)，GAK mRNA表达量亦明显下降，分别为0.23±0.04(t＝22.420，P<0.001)、0.32±0.08(t＝14.500，P<0.001)。Western blotting实验结果与qRT-PCR结果一致。流式细胞术检测结果显示，分别与两细胞株miR-NC组比较，转染miR-206后前列腺癌细胞在S期(23.60%±5.68%∶32.53%±4.52%，t＝2.462，P＝0.049；22.09%±4.35%∶30.96%±4.86%，t＝2.720，P＝0.035)和G2-M期(16.28%±7.12%∶26.63%±4.33%，t＝2.484，P＝0.048；14.60%±1.62%∶24.68%±7.13%，t＝2.758，P＝0.033)的细胞比例下降，在G0-G1期(60.13%±5.82%∶40.84%±5.37%，t＝4.872，P＝0.003；63.31%±3.27%∶44.36%±3.82%，t＝7.533，P<0.001)的细胞比例升高。EdU增殖实验结果显示，转染miR-206的细胞增殖能力明显减弱(22.56±3.81∶38.90±8.51，t＝3.503，P＝0.013；25.12±6.42∶48.45±8.92，t＝4.244，P＝0.005)。集落形成实验结果显示，两细胞株miR-NC组形成的集落数分别为218.66±44.59、177.35±24.49，miR-206组形成的集落数分别为125.38±32.80(t＝3.370，P＝0.015)、82.65±14.05(t＝6.708，P＝0.001)，提示miR-206组细胞增殖能力降低。
结论miR-206可通过干扰CDK4和GAK的表达显著抑制前列腺癌细胞的生长，提示miR-206可能成为前列腺癌的分子靶向治疗工具。
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