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目的 以聚乙烯亚胺(PEI)共价连接壳聚糖(CS)骨架上构建CS-g-PEI(CP)/质粒DNA(pDNA)纳米粒,探讨其在体外对关节滑膜细胞的转染能力.方法 复凝聚法制作CP/pDNA纳米粒,扫描电镜检测纳米粒形态,Zeta电位粒度分析仪测定其粒径、表面电位;凝胶电泳阻滞实验观察CP和pDNA的结合力;体外转染兔关节滑膜细胞,48 h后流式细胞仪及荧光显微镜检测转染效率;激光共聚焦显微镜检测1 ~2h时DNA的入核情况.结果 CP/pDNA纳米粒略呈球形,粒径为(142.0±20.3) nm,表面Zeta电位为(25.99 ±8.48) mV,可有效保护pDNA免受DNase I的降解.体外转染实验证明CP/pDNA纳米粒能介导pEGFP转染滑膜细胞并在细胞内表达绿色荧光蛋白,转染率达(22.25±1.89)%,比裸pDNA及CS/pDNA纳米粒组有更高的转染效率(P<0.05).结论 CP/pDNA纳米粒是一种有效的新型非病毒基因转染系统,对关节滑膜细胞具有良好的基因转染能力。