【摘 要】
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目的：在p53基因缺失型细胞株H1299中转染p53基因突变子175H,构建H1299-175H细胞模型,并观察小发夹环RNA（shRNA）的基因沉默效果。方法：采用引物重叠PCR定点突变技术合成p53基因突
【机 构】
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吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室,吉林省长春市卫生监督所
【基金项目】
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国家自然科学基金资助课题（30500142 30770649）
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目的：在p53基因缺失型细胞株H1299中转染p53基因突变子175H,构建H1299-175H细胞模型,并观察小发夹环RNA（shRNA）的基因沉默效果。方法：采用引物重叠PCR定点突变技术合成p53基因突变子175H,并利用基因重组技术构建出表达载体,以脂质体转染法建立细胞模型;合成针对p53-175H的shRNA并构建出反转录病毒表达载体Psuper-175HR,应用磷酸钙共沉淀法导入包装293T细胞,并收集假病毒颗粒感染H1299细胞。应用Western blotting法检测P53蛋白表达。结果
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