【摘 要】
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目的 探索小分子酪氨酸激酶抑制剂安罗替尼对鼻咽癌细胞的抗肿瘤作用及其潜在机制,为临床应用安罗替尼治疗鼻咽癌提供可靠的实验证据.方法 通过CCK-8实验和克隆形成实验检测不同剂量梯度安罗替尼对鼻咽癌细胞6-10B和SUNE-1的细胞活性、增殖能力的影响;通过Transwell和划痕实验分析安罗替尼对鼻咽癌细胞侵袭及迁移能力的影响;利用流式细胞术检测安罗替尼对鼻咽癌细胞周期及凋亡的影响;采用Western blotting验证安罗替尼处理后鼻咽癌细胞凋亡相关蛋白的表达变化.结果 在鼻咽癌细胞中加入安罗替尼处理
【机 构】
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湖南省人民医院检验科,湖南长沙,410000;中山大学附属第五医院肿瘤中心,广东珠海,519000;中山大学附属第五医院临床检验科,广东珠海,519000
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目的 探索小分子酪氨酸激酶抑制剂安罗替尼对鼻咽癌细胞的抗肿瘤作用及其潜在机制,为临床应用安罗替尼治疗鼻咽癌提供可靠的实验证据.方法 通过CCK-8实验和克隆形成实验检测不同剂量梯度安罗替尼对鼻咽癌细胞6-10B和SUNE-1的细胞活性、增殖能力的影响;通过Transwell和划痕实验分析安罗替尼对鼻咽癌细胞侵袭及迁移能力的影响;利用流式细胞术检测安罗替尼对鼻咽癌细胞周期及凋亡的影响;采用Western blotting验证安罗替尼处理后鼻咽癌细胞凋亡相关蛋白的表达变化.结果 在鼻咽癌细胞中加入安罗替尼处理后,6-10B实验组和SUNE-1实验组细胞存活分数降低,细胞集落形成数量明显减少,且呈显著的剂量依赖性,在药物浓度为2.0 μmol·L-1时可达到约50％的增殖及克隆抑制率(P＜0.01).Western blotting分析发现,安罗替尼可能是由Erk通路介导线粒体通路激活,促进鼻咽癌细胞凋亡,且以药物浓度达到2.0 μmol·L-1时作用最为明显.凋亡检测结果证实,2.0 μmol·L-1安罗替尼处理后的实验组较对照组具有更高的细胞凋亡率,且以早期凋亡为主(P＜0.001).此外,2.0μmol·L-1安罗替尼处理后的鼻咽癌细胞发生明显的周期分布改变,6-10B实验组和SUNE-1实验组均发生G2/M期阻滞,且6-10B实验组作用较为显著(P=0.0004),而SUNE-1实验组的变化无统计学意义(P=0.0723).Transwell和划痕实验结果表明,实验组侵袭和迁移能力较对照组相比显著下降(P＜0.05).结论 安罗替尼可能通过Erk通路介导鼻咽癌细胞6-10B和SUNE-1的凋亡,并抑制其增殖,有望成为治疗鼻咽癌的新型靶向药物.
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