日本血吸虫(中国大陆株)表达基因的分离和EST序列测定

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目的运用表达序列标签技术(EST方法),从Sj cDNA文库中分离、鉴定和测定血吸虫表达基因序列。方法应用EST方法,从Sj cDNA文库中随机挑选出单个重组克隆进行PCR直接序列分析,通过互联网将获得的EST序列送入NCBI GenBank进行同源性检索,并将发现的未知基因EST序列送入NCBI dbEST以获得GenBank进入号。结果分离了100个Sj重组克隆,并已对25个克隆cDNA插入片段的PCR产物进行直接序列分析,获得了21个EST序列。其中2个EST序列为GenBank中已知的血吸虫基因序列,19个为未知基因序列。这19个EST序列已被NCBI dbEST和GenBank接受并获得了新序列进入号。结论采用EST-PCR直接序列分析方法可大量获得血吸虫表达基因EST序列,为进一步开展日本血吸虫(中国大陆株)表达基因的研究奠定了基础。
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