白介素1受体相关激酶4重组过表达质粒pcDNA3.1-IRAK4的构建及转染

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目的构建重组过表达质粒pcDNA3.1-IRAK4并检验其在H9c2细胞中的表达。方法在全球科学家质粒共享非盈利组织Addgene申请到pDONR223-IRAK4质粒菌种,摇菌提取质粒后测序。设计引物将目的片段扩增并跑胶回收。将目的片段PCR扩增产物和空质粒pcDNA3.1采用BamHI和EcoRI酶切,构建重组表达质粒。将重组质粒使用两种转染试剂转染人H9c2细胞中,并借助Western blot法检测IRAK4蛋白在H9c2细胞中的表达。结果重组过表达质粒经菌落PCR、序列测定证实,扩增基因片段IR
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