【摘 要】
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目的扩增弓形虫主要表面抗原(SAG2)编码基因片段并进行重组表达.方法设计合成1对引物,从弓形虫基因组DNA中扩增SAG2基因序列,以低熔点琼脂糖回收纯化,并以限制性内切酶BamHⅠ
【机 构】
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华南农业大学动物医学院预防系,深圳市卫生防疫站分子生物室,华中科技大学同济医学院
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目的扩增弓形虫主要表面抗原(SAG2)编码基因片段并进行重组表达.方法设计合成1对引物,从弓形虫基因组DNA中扩增SAG2基因序列,以低熔点琼脂糖回收纯化,并以限制性内切酶BamHⅠ和SalⅠ进行双酶切、纯化后,再插入表达载体pGEX-4T-2,经PCR和双酶切筛选,测序验证后,在大肠杆菌中进行表达,并用SDS-PAGE和Westem blot鉴定.结果从弓形虫核酸提取物中扩增出约477bp的SAG2基因,构建成功了重组质粒pGEX-4T-2-SAG2;SAG2基因在大肠杆菌中得到高效表达.SDS-PAG
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