干扰素α抗病毒活性的实验研究

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hubai123
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目的 比较不同亚型干扰素α(IFN α2b、IFN α2a、IFN α1b)对 JAK-信号转导活化转录 因子(STAT)通道中重要信号传导分子 STAT1、STAT2、干扰素α受体(IFNAR)、蛋白激酶(PKR)、核 糖核酸酶 L(R Nase L)表达的影响,研究其抗病毒活性的差别,并评价 IFN α抗病毒活性的关键性信号传 导分子。方法 1000 U/ml 的不同亚型 IFN α分别作用于 HepG2细胞后,用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)方法检测 HepG2细胞内 STAT1、STAT2、IFNAR、PKR、RNase L mRNA 表达水平。用 western blot 方法检测细胞内 STAT1及 IFNAR 蛋白表达水平。结果 RT-PCR 的实验结果:(1)IFN α1b 处理组 IFNAR、 STAT1、STAT2 mRNA 的表达水平较 IFN α2b 组高,两组比较差异无统计学意义。IFN α1b、IFN α2b 处 理组 IFNAR、STAT1、STAT2 mRNA 水平明显较 IFN α2a 组高,差异均有统计学意义,F 值分别为5.26、 15.6、4.67,P 值均<0.05。(2)IFN α1b、IFN α2b、IFN α2a 处理后的 PKR 表达水平相似,3组比较差异 无统计学意义。(3)RNase L 表达量极少,无法比较不同处理组间 RNase L mRNA 表达水平的差异性。Western blot 实验结果:(1)IFN α1b 处理组 IFNAR、STAT1蛋白水平较 IFN α2b 处理组高,两者比较差异无统计 学意义,IFN α1b、IFN α2b 处理组 IFNAR、STAT1蛋白水平较 IFN α2a 处理组明显升高,差异有统计学 意义,F 值分别为17.7、20.1,P 值均<0.05。结论 IFN α2b、IFN α2a、IFN α1b 均可促进 JAK-STAT 信号通道中 STAT1、STAT2、IFNAR mRNA 及蛋白表达,IFN α1b 和 IFN α2b 作用较强,IFN α2a 作用 较弱。初步表明,IFN α1b、IFN α2b 的抗病毒活性较 IFN α2a 强,IFNAR、STATl、STAT2可作为评价 IFN α抗病毒活性的关键性指标,而 PKR、RNase L 能否作为评价指标有待进一步的实验证实。
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