胚胎干细胞滋养层细胞的培养及其预处理条件

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目的 :探讨胎鼠成纤维细胞作为胚胎干细胞的滋养层细胞在培养、传代及预处理等方面的条件。方法 :用胰蛋白酶消化法培养胎鼠成纤维细胞 ,观察细胞在增殖、传代、冻存及复苏等方面的条件 ;用不同浓度的丝裂霉素对细胞进行预处理 ,利用MTT法测定细胞的生长曲线 ,筛选最佳浓度及作用时间。结果 :胎鼠成纤维细胞的增殖速度较快 ,在第 4代以后细胞开始变形并趋于衰老 ;以 2 0mg·L- 1 丝裂霉素处理细胞 2h ,可明显抑制细胞的增殖而不引起细胞的死亡。结论 :作为滋养层细胞 ,胎鼠成纤维细胞应选择第 4代以前的细胞 ,丝裂霉素处理条件为 2 0mg·L- 1 作用 2h。
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