【摘 要】
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将表达H9亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒疫苗连续传代至30代,取第10、20、30代重组病毒作为受检代次,进行外源基因片段的克隆与测序,以间接免疫荧光试验检验各代次的表达,
【基金项目】
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江苏省高校高新技术产业发展项目，江苏省科技攻关项目
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将表达H9亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒疫苗连续传代至30代,取第10、20、30代重组病毒作为受检代次,进行外源基因片段的克隆与测序,以间接免疫荧光试验检验各代次的表达,并以第10、20、30代重组鸡痘病毒疫苗进行免疫保护效力试验.对各代次模板进行PCR反应,分别扩增出特异的1.7 kb外源基因片段,酶切位点与原始代次相同;各代次外源基因序列与原始序列相比,仅有1个碱基发生变化,不涉及氨基酸的变化;免疫荧光试验显示各代次均有显著表达;各免疫组在免疫后第7、10、14、20天的HI抗体效价(log2)
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