【摘 要】
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利用HPLC测定二硫苏糖醇(DTT)对苏云金芽孢杆菌伴胞晶体降解的影响.结果表明,放置时间对DTT溶液的变化影响显著,随着DTT放置时间的延长,2个峰的保留时间都随之延长.利用不同
【机 构】
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福建省农科院生物技术中心农业环保技术研究室,德国波恩大学植物病理研究所
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利用HPLC测定二硫苏糖醇(DTT)对苏云金芽孢杆菌伴胞晶体降解的影响.结果表明,放置时间对DTT溶液的变化影响显著,随着DTT放置时间的延长,2个峰的保留时间都随之延长.利用不同浓度的DTT降解Bacillus thuringiensis,伴胞晶体时,其检测结果都出现保留时间小于15.00min的4个主峰,与DTT单独添加在Na2CO3-HCl缓冲液lh后检测的保留时间大于25.00min的2个峰明显不同,也比伴胞晶体单独添加到Na2CO3-HCl缓冲液1h后检测的结果多了1个新峰,并且峰高显著增加,这表明DTT对晶体起到降解作用.峰1和峰4的保留时间与Na2CO3-HCl缓冲液所测到的色谱特征峰相近,峰2和峰3为Na2CO3-HCl缓冲液不具有的.在用不同浓度的DTT在37℃下降解B.t.伴胞晶体1h后,立即用HPLC进行检测的结果表明峰2高于峰3,峰2的高度与DTT的浓度成正相关;放置24h后所有处理中峰2的高度都下降,峰3的高度都高于峰2,峰2(Y1)和峰3(Y2)的峰高都与DTT的浓度(x)成指数增长,Y1=19.133e0.0148x(R2=0.9708)和Y2=29.062e0.0168x(R2=0.9589);上述结论表明在DTT的作用下,伴胞晶体不断地被降解,使得峰3不断增高,DTT的消耗,使得峰2下降;随着DTT浓度的增大,峰2和峰3的高度都呈现指数增长;在伴胞晶体降解物中继续加入DTT进行定性分析,峰2高度增大114.59%,而峰3仅增加55.56%(可能是DTT继续降解的结果),而峰1和峰4无显著变化.可以推断峰2是DTT,峰3是伴胞晶体降解物-原毒素的特征峰.
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