N端缺失突变对核糖核酸酶抑制因子活性的影响

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanjian2009
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人胎盘核糖核酸酶抑制因子(HRI)是一种存在于细胞浆中的50kD的酸性蛋白质,富含亮氨酸和半胱氨酸.作为胞浆蛋白可保护细胞不受外来胰RNase侵袭.HRI主要结构是由7个富含亮氨酸的重复序列组成,7个亮氨酸重复单位有规律环状排列使N端、C端在空间上较为接近.用PCR方法在HRI cDNA 5′端去除30个核苷酸,并将此缺失突变的HRI的cDNA片段构建于质粒pPIC9K,电击转化入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,进行分泌型表达.对表达产物进行亲和层析纯化.实验结果表明,N端缺失突变
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