【目的】探索罗汉果渣发酵料替代部分日粮对富凤麻鸡大肠微生物群落多样性的影响，同时评估罗汉果渣发酵料替代日粮的最佳比例，为罗汉果渣发酵料在鸡养殖生产中的应用提供参考依据。【方法】选定60日龄的富凤麻鸡（母鸡）20羽，随机分成4组，每组5羽；使用罗汉果渣发酵料分别替代3%（A组）、6%（B组）、9%（C组）及0%（CK组）的日粮；以A、B、C组为试验组，以CK组为对照组，进行为期97 d的饲养试验，其中预饲期7 d，正式期90 d。饲喂结束后，采集鸡大肠内容物，基于Illumina高通量测序技术探究罗汉果渣发酵料替代日粮的3种比例对富凤麻鸡大肠微生物群落多样性的影响。【结果】chao1指数排序为CK（1158.19±132.34）＞C（1033.92±239.37）＞A（966.02±302.65）＞B（961.45±428.71）；Shannon指数排序为CK（8.40±0.09）＞C（8.22±0.35）＞A（7.94±0.23）=B（7.94±0.44）；Simpson指数排序为CK（0.99）=C（0.99）＞A（0.98）=B（0.98）。经Wilcoxon检验，各试验组和CK组的Chao1指数并无显著差异（P＞0.05，下同），表明罗汉果渣发酵料替代3%、6%和9%的日粮对富凤麻鸡大肠细菌群落物种的丰富度均没有影响；A组的Shannon指数显著低于CK组（P＜0.05，下同），其他试验组的Shannon指数与CK组无显著差异，表明罗汉果渣发酵料替代3%的日粮降低富凤麻鸡大肠细菌群落的多样性，而6%和9%的替代比例不影响富凤麻鸡大肠细菌群落的多样性；A、B组的Simpson指数显著低于CK组，而C组的Simpson指数与CK组无显著差异，表明罗汉果渣发酵料替代3%和6%的日粮均降低富凤麻鸡大肠细菌群落的多样性，而9%的替代比例不影响富凤麻鸡大肠细菌群落的多样性。门的水平上共注释出29个细菌门，其中拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门是4组中的绝对优势菌门。拟杆菌门的相对丰度排序为C（43.03%）＞CK（39.93%）＞A（36.26%）＞B（32.97%），厚壁菌门的相对丰度排序为B（31.61%）＞A（30.24%）＞CK（28.38%）＞C（27.29%），变形菌门的相对丰度排序为A（22.25%）＞B（21.64%）＞CK（14.54%）＞C（10.93%）。其中，A组的变形菌门相对丰度显著高于CK组，C组的变形菌门相对丰度显著低于CK组，而B组的变形菌门相对丰度与CK组无显著差异。属分类水平上，变形菌属的相对丰度在4组中有显著差异，其相对丰度排序为B（10.63%）＞A（10.02%）＞ CK（5.7%）＞C（2.52%）。其中，C组的变形菌属相对丰度显著低于CK组，而A、B组与CK组无显著差异。【结论】用罗汉果渣发酵料替代3%、6%和9%的日粮饲喂富凤麻鸡，不影响鸡大肠细菌群落的物种丰富度；3%和6%的替代比例均会降低富凤麻鸡大肠细菌群落的多样性，而9%的替代比例对鸡大肠细菌群落多样性无影响；6%的替代比例虽降低鸡肠道中益生菌双歧杆菌的丰度，但不影响肠道变形菌门的丰度，为最佳的替代比例。