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以棉花叶片为材料，针对试材中含有大量色素、酚、醌等干扰物质的问题，从蛋白提取方法、裂解液成分、上棒量等方面对棉花叶片蛋白质组双向电泳技术进行优化。结果表明：采用改良的TCA／丙酮法提取棉花叶片总蛋白，含有7mol·L-1尿素、2mol·L-1硫脲、4％CHAPS、80mmol·L-1 DTT、1mmol·L-1 PMSF、0.3％载体两性电解质的裂解缓冲液，上样量为600ug，采用pH4～7、24cm的IPG胶条进行双向电泳时，2-DE图谱的蛋白点分布均匀、清晰且重